HPLC發展以來，一直站在堅如磐石的基礎上，并見證了多項創新，滿足了色譜工作者日益增長的期望。


科學家的一些理想特征和期望是：

以最低的柱背壓實現高分離效率
減少溶劑消耗和高速分析
低水平的檢測和定量
在寬溫度范圍內分離
幾乎完整的 pH 值范圍可用于分析
填充柱的機械強度更高
色譜柱使用壽命更長
柱子的大樣品裝載能力
通過多項創新，已經有可能實現理想的功能，這些創新對 HPLC 技術在全球實驗室中的普及做出了顯著貢獻。


固定相的進展
固定相特性是通過高效液相色譜有效分離混合物組分的主要決定因素。迄今為止，硅膠色譜柱主要用于大多數分離。然而，最近開發的包裝材料開辟了新的應用領域。


超壓液相色譜 (UPLC)
柱效隨著粒徑的減小而增加。亞 2μm 粒徑于 2003 年推出，為快速分離鋪平了道路。減少色譜柱長度和直徑以提供更快的分離和更高的靈敏度成為可能。小尺寸顆粒會造成柱背壓升高的問題，這可以通過儀器的進步以允許在高壓下操作來克服。


納米孔和微孔高效液相色譜
對有限數量的樣品進行分析一直是一個挑戰。納米孔高效液相色譜提供解決方案，以實現飛摩爾級的高質量分辨率，以實現可靠的識別和定量。納米柱的內徑小至 75 μm，流速高達 300 nL/分鐘，用于納米孔應用。


微孔 HPLC 柱的內徑約為 1 mm，流速為 50-75 μL/分鐘。納米孔色譜柱和微孔色譜柱均已充分發揮其質譜檢測系統的潛力，特別是在生物基質中的肽分析中。


聯用液相色譜技術
已經開發了多種聯用技術，例如 LC-MS、LC-FTIR、LC-AAS，但 LC-MS 已廣泛應用于一系列復雜分子的分離和定量，特別是在生物分析分離中。


快速蛋白質液相色譜
該模式主要應用于蛋白質的純化。它具有從毫克級到公斤級分離的潛力。分離和隔離基于樹脂和蛋白質之間的電荷分離。洗脫基于緩沖液組成的變化。


親和層析
親和色譜在分離生物化學分子（如核酸）和生物體液（如血液）中的蛋白質純化方面具有潛力。它基于抗原-抗體、酶和底物或受體以及配體之間的相互作用。


手性色譜
立體活性柱填料的發展主要是多糖衍生物，如纖維素、淀粉酶和環糊精，已用于廣泛的旋光分子。在早期，使用傳統的分離模式無法分離此類分子。