鑒于高效液相色譜在整個行業的廣泛應用，每個實驗室分析員都應該精通高效液相色譜的應用，能夠分析一些常見的故障，從而在運行故障時解決問題，提高工作效率。根據多年經驗，總結保留時間漂移、變化快、柱壓不穩定的原因，僅供參考！


　　關于漂移問題：


　　控溫不良：解決辦法是用恒溫裝置保持柱溫恒定；


　　當流動相發生變化時，應防止其蒸發和反應；


　　(3)柱平衡不好，柱平衡時間較長。


　　關于快速變化


　　(1)關于流量的變化，操作員需要重新設置流量以保持其穩定；


　　(2)泵內有氣泡，可通過排氣等操作排出；


　　流動相不合適。解決辦法是在控制室更換或混合流動相。


　　Q2:拖尾或雙峰的原因是什么？


　　篩板堵塞或色譜柱故障：解決辦法是反沖洗色譜柱，更換篩板或更換色譜柱；


　　有干擾峰。要解決它，運算符需要使用更長的列；更換選擇性好的流動相或色譜柱；


　　色譜柱可能過載，從而減少進樣量。


　　Q3:HPLC靈敏度不足的主要原因及解決方法是什么？


　　樣本量不足：解決辦法是增加樣本量；


　　樣品沒有流出色譜柱。流動相或色譜柱可根據樣品的化學性質更換；


　　樣品與檢測器不匹配。根據樣品的化學性質調整波長或更換檢測器；


　　探測器衰減過大。調節衰減；


　　探測器的時間常數過大。解決辦法是減少時間參數；


　　檢測池窗口污染。解決辦法是清潔泳池窗戶；


　　檢測池內有氣泡。溶液正在排空；


　　記錄儀的壓力測量范圍不合適。只需要調整電壓范圍；


　　流動相流動不合適。只需調節流量；


　　參加檢測器和記錄器超過校準曲線。解決辦法是檢查記錄儀和檢測儀，重新制作校準曲線。


　　Q4:進行高效液相色譜分析時，柱壓不穩定。原因是什么？怎么解決？


　　比例閥故障：更換比例閥；


　　泵密封損壞：更換密封；


　　溶劑中的氣泡：解決辦法是對溶劑進行脫氣，必要時改變脫氣方式；


　　系統檢查泄漏點，查找泄漏點并密封；


　　梯度洗脫，壓力波動正常時。


　　問題5:操作人員更換了另一個ODS柱，但保留時間無法重現。為什么呢？


　　這是因為分析物可能具有形成氫鍵的能力。雖然近年來填料的制造技術有了很大的提高，但不同廠家的ODS填料表面硅烷醇基的濃度是不同的。正是這些硅烷醇基可能與樣品相互作用。


　　因此，相同分析物成分在不同ODS柱上的相對保留時間可能不同。在流動相中加入少量的競爭對手，如三乙胺(TEA)，會使硅烷醇基的鍵合能力飽和，從而保證在不同等級色譜柱上相對保留時間的良好重現性。如果分離條件好，系統穩定，滿足系統適用性要求，無需重復保留時間。