高效液相色譜的分離原理
發布時間:2021-07-27
在科學實驗中,高效液相色譜儀是一種分析儀器,用于分離、定量和鑒定混合物中的每一種成分。這種技術依靠泵將一些含有樣品混合物的受限液體溶劑推過含有固體吸收材料的色譜柱。樣品中的每種成分與吸收材料的相互作用方式略有不同。這將導致不同組分的流速不同,這將導致組分在離開色譜柱時分離。高效液相色譜系統主要用于制造業、醫藥和研究。
在制造業中,高效液相色譜主要用于生物和醫藥產品的生產過程。在醫學上,它用于檢測血清中維生素D的含量。在研究中,高效液相色譜有許多用途。一個很好的例子是生物樣品中成分的分離,其中大部分是復雜的。高效液相色譜用于根據化合物的極性對其進行分離和純化。為了理解等級,你可以學習使用油、水和乙醇的簡單例子。乙醇是極性的,可以和水適當混合。相反,油不是極性的,所以它不能很好地與水混合。
高效液相色譜柱,也稱為固定相,由不同的物質組成,主要是二氧化硅,性質非常緊湊。長碳鏈功能化二氧化硅顆粒。碳鏈是非極性的。因此,鏈越長,柱的極性越小。C18色譜柱是最常用的色譜柱。它包含18個碳鏈。
高效液相色譜可以從環境樣品、醫學化學、微生物學和環境樣品中分離化合物。將化合物注入高效液相色譜柱,流動相實際上是水和有機溶劑的混合物,然后引入。使用的大多數有機溶劑是甲醇或乙腈。這被稱為流動相,因為混合物在整個高效液相色譜柱中移動,同時仍然洗去柱中的化合物。洗滌過程也稱為洗脫。
化合物通常與濃度梯度一起洗脫。簡單來說,一段時間后流動相中的水量會減少,因為非極性溶劑的百分比會同步增加。那么流動相中的成分會變得更加非極性。所用樣品中含有的化合物將附著在色譜柱的碳鏈上。大多數非極性化合物的附著力強,而大多數極性化合物的附著力弱。
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島津高效液相色譜