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高效液相色譜法(HPLC)概述

發布時間:2023-02-14

高效液相色譜是20世紀70年代迅速發展起來的一種高效、快速的分析分離技術,是現代分離檢測的重要手段。
色譜的分離原理是當溶解在流動相中的組分通過固定相時,與固定相的相互作用(吸附、分布、排斥、親和力)的大小和強度不同,在固定相中的保留時間也不同,因此從固定相相繼流出。也叫色譜法,色譜法。
高效液相色譜儀
高效液相色譜法(HPLC)是在經典的液相色譜法基礎上不斷發展結合起來的,其以液體可以作為企業流動相,并采用不同顆粒極細的高效固定相的柱色譜進行分離控制技術。其分離管理機制與常規柱色譜條件相同,但填料更加需要精細,需高壓泵推動,柱效高,分析處理速度快。
與氣相色譜法不同的是,液相色譜中的流動相還涉及組分的分離過程,其組成、比例和 pH 值可以靈活調節,分離方式也多種多樣。在實際操作中,可以通過改變流動相的組成來調節色譜柱上樣品的保留值和選擇性,從而實現不同樣品的分離。

高效液相色譜應用廣泛,不受分析對象揮發性和熱穩定性的限制。幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子化合物和大分子物質都可以用HPLC進行分析測定,從而彌補了氣相色譜的不足。在已知的有機化合物中,大約20%可以用氣相色譜分析,而80%需要用高效液相色譜分析。




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