高效液相色譜中遇到的問題會讓人感到煩躁。你正在進行一些分析操作，在你弄清楚你的儀器為什么不起作用之前，你沒有辦法再繼續進行你的分析。高效液相色譜柱的一些常見問題時有出現。知道這些是什么以及如何解決它,請繼續閱讀找出其中的一些問題以及如何解決它們。如果沒有你想要的答案請聯系我們，我們樂意為你效勞。


　　1.沒有峰值

　　可能有多種因素導致您的高效液相色譜輸出中沒有峰或峰很小。正常讀數應該有大而薄的峰，峰的高度可能略有不同。小峰值或沒有峰值可能意味著您的檢測器燈關閉、沒有流動相流動、樣品丟失或變質，或者您的檢測器、積分器、進樣閥或記錄儀有問題。

　　確保您的檢測器首先打開，然后檢查所有電氣連接和電纜。確保自動進樣器小瓶中有足夠的液體，并且樣品中沒有氣泡，然后用新的標準溶液重新檢查系統。如果這不起作用，請檢查衰減或增益設置狀態，并在必要時自動歸零。


　　2.沒有流量

　　如果您的輸出完全沒有峰，則高效液相色譜柱中可能沒有流動。這可能意味著您的泵已關閉，或者流量以某種方式中斷或阻塞。泵頭中也可能有泄漏或空氣。

　　如果泵已關閉，則啟動泵并檢查儲罐中的流動相液位和整個系統的流量。檢查樣品回路是否有任何障礙物或氣鎖，并確保流動相成分可混溶，且流動相已正確脫氣。

　　從那里繼續檢查系統安裝是否松動，泵是否有泄漏或其他問題。斷開保護柱上的管道(如果有)并檢查流量。如果仍有問題，請以高流速清洗泵和灌注系統，并松開系統可能有的所有止回閥。如果所有其他方法都失敗，請用100%甲醇或異丙醇沖洗系統。


　　3.壓力問題

　　如果你的壓力比平時低或者你沒有壓力，你的系統可能有泄漏或空氣停滯。您也可能有一個故障止回閥，或流動相流動受阻或中斷。如果您的系統壓力過高，泵、注射器、在線過濾器或管道可能有問題，或者您的保護柱或分析柱可能堵塞。

　　對于低壓，首先檢查整個系統是否有泄漏、接頭松動、泵密封故障或閥門損壞。如果一切正常，運行我們之前討論的相同流動相檢查，并檢查分析柱和保護柱的流量。如果這不起作用，重新連接所有設備，并嘗試以兩倍的流量泵送溶劑。

　　對于高壓，首先從系統中移除保護柱和分析柱，并用雙通閥替換它們，以將注射器重新連接到檢測器。以2-5 mL/min的速度運行泵，并嘗試隔離原因，從檢測器開始，然后是在線過濾器，然后返回泵。如果問題似乎出在分析柱上，當分析柱與檢測器斷開連接時，反轉并沖洗分析柱，必要時更換入口篩板或分析柱。


      4.分裂峰

　　如果你開始看到峰在中間向下傾斜，形成一個M形，那么在你的保護柱或分析柱的入口處可能會有一些污染。你也可能有部分堵塞的篩板或不均勻的縫隙在塔的入口。您的樣品溶劑也可能與流動相不相容。

　　如果您認為入口被污染，反轉并沖洗色譜柱，必要時更換篩板。也可以在色譜柱頂部重新填充具有相同鍵合相功能的薄膜顆粒，然后繼續反向使用色譜柱。

　　如果您認為問題出在樣品上，請在流動相中調整樣品。樣品和流動相之間的酸堿度差異導致峰分裂。


        5.拖尾和前沿峰

　　你可能會注意到，你的頂峰不是直線上升和下降，而是在前面或后面開始輕微傾斜，這被稱為向前或向后移動。這通常意味著您的保護柱或分析柱可能磨損或色譜柱可能過載。拖尾可能由樣品中污染或變質的流動相或干擾流動組分引起，而推進可能由樣品中的溶劑問題引起。

　　如果有拖尾峰，首先取下保護柱，試著分析，必要時更換。您可能還需要恢復或替換分析列。一定要檢查流動相的組成和色譜柱的性能。

　　如果您有一個前峰，請嘗試注入更小的體積或稀釋樣品。如果您的溶劑有問題，請調整溶劑，在開始分析之前，用50柱體積的高效液相色譜級乙酸乙酯以標準流速的2或3倍沖洗極性鍵合相柱，然后用中等極性溶劑沖洗。您可能還想嘗試其他列類型。


　　6.負峰

　　如果你看到負峰開始出現，可能是你的記錄儀的導線接反了。溶質的折射率可能低于流動相的折射率，或者樣品溶劑和流動相的組成有很大的不同。您的流動相也可能更能吸收樣品成分吸收的紫外線波長。

　　檢查記錄儀電線的極性，確保它們沒有反轉，然后嘗試反轉電線或使用折射率較低的流動相。您可以調整或更換樣品溶劑，最好盡可能在流動相中稀釋樣品。如果問題出在紫外波長，請在使用間接紫外檢測時改變極性，或者使用吸收所選波長的流動相。


　　了解如何解決高效液相色譜柱的問題

　　解決高效液相色譜柱的問題可能會令人沮喪，但請記住，這就像您必須解決的任何其他問題一樣。批判性地思考問題的可能原因，開始消除可能性，并遵循這里建議的解決方案。您將立即恢復并運行高效液相色譜柱。