科學家在他們的工作中會經常分析有機混合物和化學反應混合物。因此高效液相色譜 (HPLC) 系統是任何實驗室最重要的儀器之一。高效液相色譜儀器允許分離和分析這些混合物。在這種類型的柱色譜中，固定相的粒徑小到使溶劑難以通過；為了克服這個問題，應用了 3000-5000 psi 的高壓。它是最靈敏、最有效和最準確的技術。

1.按照章程穿戴好專業服。
清潔高效液相色譜。
打開它并等待它開始。
準備儀器進行分析。
將溶劑保持在溶劑容器或溶劑托盤中的流動相中。溶劑用于分離混合物的組分。在現代儀器中，溶劑混合物可用作流動相，稱為梯度洗脫。洗脫是分離成組分。
使用甲醇-水或氯仿-庚烷等作為溶劑。


2.根據相的相對極性選擇高效液相色譜類型：
正相：如果進行正相高效液相色譜，請使用比較極性的固定相而不是流動相。
反相 HPLC：與流動相相比，使用極性較小的固定相。一般使用反相。


3.將數據輸入系統或對高效液相色譜進行編程。
當您選擇梯度洗脫時，將編號分配給溶劑。
指定流速。
調節泵的壓力。


4.分析您的樣本。
在進樣器系統中添加您的樣品。這是將樣品（待分離的混合物）引入系統的機制。
將固定相裝入色譜柱。
單擊連接到它的計算機屏幕上的啟動按鈕啟動 HPLC。
等待一段時間以將混合物分離成組分。保留時間是溶劑分離組分所用的時間，它等于您將混合物輸入色譜柱到檢測/分析它的時間。


5.開發您的組件。等待你的混合物被分離成它的成分。這稱為顯影，此時檢測器將檢測樣品內容。


6.觀察結果。查看在圖表上檢測和記錄的組件的分離。將有與組分及其濃度相對應的各種峰。


7.將您的發現應用到您的工作中。高效液相色譜在制藥、化學和食品生產等行業有很多用途。一些重要的應用程序如下。
通過比較在相同條件下觀察到的保留時間，將其用于定性分析。
利用 HPLC 進行定量分析，例如評估成分濃度。
分析脂質分離。
在刑事/毒物案件的法醫工作中使用它作為答案。