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高效液相色譜是一種令人驚訝的分析化合物的技術，包括生物聚合物、小分子和聚合物。在該方法中，樣品首先被溶解以制備溶液。然后將溶液注入含有與樣品相互作用的樹脂的“柱”中。這將減緩樣品通過“柱”的運動，當樣品從柱的另一側出來時，它將被檢測到。這使您可以知道樣本何時出來以及檢測到的樣本的強度。
當一些緩沖液連續流過色譜柱時，我們也注入樣品，觀察樣品中不同的分子在不同的“保留時間”出現。色譜柱末端的檢測器可以是任何類型的檢測器，但最常見的類型是折射率(RI)、紫外(DAD)和熒光(FLD)。每一個都將檢測從色譜柱出來的分子的不同特征，并顯示色譜圖。
色譜類型
不同的色譜柱樹脂組成決定了您運行的色譜類型和可以分離的分子。
正相：色譜柱充滿極性二氧化硅顆粒，流經系統的緩沖液是非極性的。注射樣品后，極性顆粒會比非極性分子更容易粘附在硅膠上，保留時間也更長。
反相：色譜柱內充滿疏水顆粒(實際上是表面長有碳氫化合物的硅膠顆粒)。流經系統的緩沖液是極性的(例如，乙腈/水或甲醇/水混合物)。這意味著疏水分子將更多地粘附在樹脂上，并停留更長時間。
完整的分步高效液相色譜指南
材料
| HPLC 自動進樣器樣品瓶 | 我只使用自動進樣器，因為手動進樣很乏味
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