親和色譜是一種分離過程，用于純化生化混合物中的一個分子或一組分子。它采用兩個階段；固定相和流動相，流動相中的特定分子將根據其特性與固定化結合，而通過溶液的其余部分不會受到影響。

該過程通常用于純化生物分子，如酶、抗體和重組蛋白。它也可以通過同樣的原理幫助去除病原體等有害物質。

例如，溶液中的蛋白質可以通過與另一個對蛋白質具有親和力的分子(配體)連接的柱來純化。當它們結合時，這將允許未反應的、未結合溶液通過柱。然后，通過改變緩沖液條件，從配體上洗脫目標分子，從而可以從表面去除蛋白質。

這一過程通常涉及與其同源伴侶相互作用的分子基團，如酶和底物、抗原和抗體，以及配體和受體。因此，純化需要了解兩組不同的分子如何相互作用。


靜止相

對于固定相，科學家有許多選擇：
多孔載體——使用的材料包括瓊脂糖、纖維素、二氧化硅、聚甲基丙烯酸酯，可以獲得不同的孔徑。
無孔載體-與多孔載體相比，這些載體的表面積往往較低，盡管它們可以加快凈化速度。
整體支撐-這些結合了大小流孔。
膜-這些可以用于更快的凈化，但由于缺乏孔，它們的表面積減少了。
膨脹床吸附劑-這些是為了防止色譜柱堵塞而設計的。
灌注介質(流動珠)-這些孔有不同的大小。
載體的粒徑非常重要。較小的分子可以導致較大的表面積，但污染物積累和難聞氣味的可能性更大。較大的粒子可以解決這些困難，所以它們經常被用作替代品。

重要的是，所選的固定相不能吸引溶液中除純化所需分子以外的任何分子。它需要化學性質穩定，不能與各種會通過它的溶液混合，如酶、洗滌劑和洗脫緩沖液。該結構本身需要堅固，以承受可能進行的許多純化過程。


配體

結合待純化物質的配體有不同的選擇：
抗體——可以是單克隆的或多克隆的。它們的優點是高特異性和大的結合常數。
脫氧核糖核酸-這可用于聚合酶、脫氧核糖核酸結合蛋白、解旋酶和限制性內切酶。
氯代三嗪多磺化芳香族分子-這些分子用于裂解酶、水解酶、糖酵解酶、氧化還原酶等。
生物識別染料配體-這些可用于蛋白質純化。
肽-這些用于生物分子。