什么是葉綠素 a?
葉綠素是植物體內的綠色色素,可光作用下產生能量-光合作用。通過測量葉綠素,可間接測量樣品中光合作用植物(藻類或浮游植物)的量。葉綠素 a 色素適用于所有植物種類,而其他葉綠素(如 b,c1,c2,d,f)只適用于一些特定的植物、藻類或藍藻細菌,可用來指示一些主要藻類團的存在。賽默飛紫外分光光度計可以更準確的測量出葉綠素。
為什么要測量葉綠素 a?
營養物(如磷和氮)的流入內陸或沿海的水體,會造成藻類的瘋長。隨后的腐爛會降低水體中樣品的含量,影響魚類、貝類、甲殼類等生物的生存環境。右圖說明了葉綠素 a 和溶解性無機氮(DIN)2的相關性。營養物載荷的變化同樣能改變浮游植物總群的構成和多樣性。
藻類濃度高說明了水質惡化,濃度低則水質較好。浮游植物的增加會讓水變渾濁,影響海草生長和相關的漁場。在一些極端事件中,富營養化會造成缺氧(無氧“死區”會殺死魚類、貝類和甲殼類生物)有毒有害藻類的爆發。從水質方面來看,葉綠素 a 是現有手段中能最佳、最直接的方法,可測量浮游植物數量和質量以及潛在導致水變渾濁和低溶解氧損害。3葉綠素 a 的單位是 μg/L 或 mg/L,一般認為超過 100μg/L4的量就會對魚類產生影響。即使最清潔的水也會含有將近 5μg/L5葉綠素 a。針對水體的不同用途和目標,存在一些特定的水質標準。準確來講賽默飛紫外可見分析儀可以通過對葉綠素a的檢測,來判斷水質的具體狀況。
哪些用戶需要測量 葉綠素A (chlorophyll a)?
擁有地表水蓄水庫的自來水廠需要測量葉綠素 a 來控制水源。通常包括預測和控制藻類爆發或確定避免藻類進入的取水點,以避免過濾系統堵塞、有機負載增加、引起公共健康損害,而必須額外的處理過程。在美國,測量葉綠素 a 的機構有:美國陸軍工程兵團、US EPA 國家環保署、州環保局和實驗室;切薩皮克灣計劃、USGS 美國地質調查局、NOAA 國家海洋和大氣治理署、佛州 Audobon、學術機構等。如何測量 葉綠素 a (chlorophyll a)?
將已知量的水樣過濾,通常是玻璃纖維過濾器。過濾器需要在丙酮溶液中研磨,然后進行加工和分析。通常有三種標準方法來測量葉綠素 a:分光光度法、熒光法、高效液相色譜法(HPLC)。分光光度法是實驗室最常用的方法,樣品處理通常只需要 1-5 分鐘,一般測量下限是 0.08 mg/L6(用 1cm 比色池),儀器成本也很低。HPLC 能夠區分葉綠素的種類和輔助色素,但是測量耗時且技術要求更高,一般要 20-25 分鐘來處理樣品。1 臺 HPLC 的可能可以買 10 臺非常好的分光光度計,并且后續的耗材成本也很高。熒光法間接測量葉綠素 a,更適合遠程監控。
使用的分光光度計需要較窄的光譜帶寬,及多個波長來測量。如三色法使用 750nm(濁度校正)、664nm(葉綠素 a)、647nm(葉綠素 b 校正)和 630nm(葉綠素 c1、c2 校正)。左圖 7為葉綠素 a 和 b 的吸收光譜。另一個替代方法是在酸化前后用 750、664、665nm 來測量,可校正脫鎂葉綠素 a 和濁度的干擾。根據選擇的方法來挑選波長和方程。認可的葉綠素 a 測試方法有:US EPA 446.0,Standard Methods 10200H,ASTM D3731,DIN 38412-16,ISO 10260 等。測量 葉綠素 a (chlorophyll a )的設備比較多,有液相色譜儀,紫外分光光度計等,推薦設備Thermo Scientific Orion AquaMate 8000 紫外可見水質分析儀測量葉綠素a性能可靠,表現卓越,符合上述各測試方法的要求。該儀器光譜寬僅1.8nm,覆蓋所有需要的波長,可使用從1-10cm的比色池(瓶),可提供精確、可靠、便捷的測量性能。其它附件、耗材,包含:
? 1 cm (10 mm) 玻璃比色池,PN 331709-000
? 波長準確性和儀器性能驗證標準濾光片,PN 333150,
? 標準濾光片再校正服務(PN 333150) , PN 701-101600
? 分光光度計性能校正服務(每年一次)