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色譜技術是在反相條件下進行的，但其他色譜技術是在自然分離條件下進行的，需要高離子強度、100%水洗脫液。對于高效液相色譜系統，這些條件可能是有問題的：沒有殺菌劑，缺乏適當的維護可導致細菌污染數小時內。高鹽濃度的存在增加了流動相中顆粒的可能性。液相色譜系統中細菌和微粒的存在將影響色譜的質量和色譜柱的壽命，色譜系統的組成部分同樣重要。如果色譜系統不是惰性的或生物相容性的，則可能發生金屬-蛋白質加合物或不期望的蛋白質-蛋白質相互作用。如果色譜系統的潤濕路徑中含有鋼組分，長期使用離子強度高的100%流動相也會導致生銹。然而，通過正確設置和維護色譜系統，可以在最短的停機時間內實現穩定和可重復的色譜。
尺寸排除和/或離子交換色譜系統的維護和使用需要許多與任何其他系統相同的標準實踐。然而，高鹽溶液流動相需要一些附加協議。盡管本文件中概述的實踐適用于acquity UPLC系統，但這些原則適用于任何色譜系統。整體系統建議包括：如果使用鋼系統，請根據制造商的建議進行修改。對于與waters UPLC系統一起使用，我們提供了詳細的指南。
1.正確清潔實驗室玻璃器皿
2.如果觀察到慢性填料損失、止回閥問題、保留時間再現性、壓力或定量再現性，請根據標準方案清潔系統。3
3.如有可能，使用含有抗菌劑（即0.02%疊氮化鈉）的流動相防止微生物生長
4.保留時間或壓力波動可能表明泵有問題
5.峰面積或峰變化無保留時間變化可能表明注入器有問題
6.其他建議按成分列出。這些因素包括微生物生長、系統適用性和/或蛋白質穩定性
溶劑輸送系統：
SEC和IEX中使用的緩沖液有利于微生物生長，導致柱和系統污染（圖1）。建議包括：
1.始終通過兼容的0.22μ 水基流動相采用M以下的膜過濾器過濾。也建議使用無菌過濾器和容器
2.僅使用高純度水（18.2 m）Ω 瓶裝水應在使用當天打開，不要“加滿”流動相瓶。更換流動相時務必更換瓶子
3.高離子強度洗脫液（>；100 mm）應每兩周更換一次低離子強度洗脫液（<；100 mm）應每2-3天更換一次
4.水（100%）瓶應每天更換
5.更高的鹽濃度可抑制微生物生長，減少溶劑更換的頻率。雖然改變流動相并不總是可行的，但四元溶劑混合體系可以通過與高濃度緩沖液相結合來實現（>；100 mm）產生sec和IEX流動相，以達到相同的效果。
6.應每天目視檢查所有洗脫液瓶是否有微生物生長和/或顆粒。微生物生長可以是瓶子表面的一層薄膜，也可以通過旋轉瓶子來觀察；如果洗脫液瓶子中出現微生物生長，則更換流動相過濾器或用70%異丙醇溶液沖洗。微生物會污染流動相過濾器
7.使用兼容的流動相過濾器，如鈦。每周清潔流動相過濾器以減少微生物污染。超聲波處理或用70%異丙醇溶液清洗
8.建議的密封清洗周期為0.10分鐘（6秒）
9.建議用90/10水/甲醇清洗密封
10.溶劑管理器不應在高鹽流動相或100%水中閑置
11.短期儲存，保持0.1 ml/min，從所有使用的管線中提取相同百分比的流動相
12.如果系統閑置超過2天，請在每條管線中注入高純度水10分鐘。徹底沖洗系統。用90/10水/甲醇重復上述步驟。
1.正確清潔實驗室玻璃器皿
2.如果觀察到慢性填料損失、止回閥問題、保留時間再現性、壓力或定量再現性，請根據標準方案清潔系統。3
3.如有可能，使用含有抗菌劑（即0.02%疊氮化鈉）的流動相防止微生物生長
4.保留時間或壓力波動可能表明泵有問題
5.峰面積或峰變化無保留時間變化可能表明注入器有問題
6.其他建議按成分列出。這些因素包括微生物生長、系統適用性和/或蛋白質穩定性
溶劑輸送系統：
SEC和IEX中使用的緩沖液有利于微生物生長，導致柱和系統污染（圖1）。建議包括：
1.始終通過兼容的0.22μ 水基流動相采用M以下的膜過濾器過濾。也建議使用無菌過濾器和容器
2.僅使用高純度水（18.2 m）Ω 瓶裝水應在使用當天打開，不要“加滿”流動相瓶。更換流動相時務必更換瓶子
3.高離子強度洗脫液（>；100 mm）應每兩周更換一次低離子強度洗脫液（<；100 mm）應每2-3天更換一次
4.水（100%）瓶應每天更換
5.更高的鹽濃度可抑制微生物生長，減少溶劑更換的頻率。雖然改變流動相并不總是可行的，但四元溶劑混合體系可以通過與高濃度緩沖液相結合來實現（>；100 mm）產生sec和IEX流動相，以達到相同的效果。
6.應每天目視檢查所有洗脫液瓶是否有微生物生長和/或顆粒。微生物生長可以是瓶子表面的一層薄膜，也可以通過旋轉瓶子來觀察；如果洗脫液瓶子中出現微生物生長，則更換流動相過濾器或用70%異丙醇溶液沖洗。微生物會污染流動相過濾器
7.使用兼容的流動相過濾器，如鈦。每周清潔流動相過濾器以減少微生物污染。超聲波處理或用70%異丙醇溶液清洗
8.建議的密封清洗周期為0.10分鐘（6秒）
9.建議用90/10水/甲醇清洗密封
10.溶劑管理器不應在高鹽流動相或100%水中閑置
11.短期儲存，保持0.1 ml/min，從所有使用的管線中提取相同百分比的流動相
12.如果系統閑置超過2天，請在每條管線中注入高純度水10分鐘。徹底沖洗系統。用90/10水/甲醇重復上述步驟。
SEC和IEX條件通常需要樣品管理器清洗線中的高離子強度溶液（清洗/吹掃、強針和弱針）。然而，這些洗脫液可能對樣品注射器和/或針頭產生不利影響。對于通過針系統的可變流量，定期清除鹽沉積，以盡量減少維護和維修。其他建議包括：
1.確保樣品可溶于流動相，樣品管理器清洗
2.遵循制造商關于清洗溶劑的建議。例如，acquity UPLC H-class生物系統推薦的洗滌劑含鹽量小于500 mm
3.如果出現可見的鹽沉積，請清潔表面。如果再次出現積鹽，請檢查連接和系統是否有問題。4
4.如果樣品管理器閑置超過2天，用高純水清潔針頭和/或管道（至少20個周期或200秒）。用90/10水/甲醇重復上述步驟燃氣輪機；樣品管理器在100 mm）管道中的閑置時間不得超過2天
紫外線檢測器：
在水性條件下執行sec或IEX時，waters建議使用鈦或不銹鋼光流池。標準acquity光流池的流道中含有聚四氟乙烯AF。在自然條件下，一些蛋白質可能與流動細胞表面發生相互作用，導致峰值拖尾和基線傾斜。對檢測器的建議包括：使用鈦或不銹鋼流動細胞來減少蛋白質與表面的相互作用。其他流動池材料（即特氟隆）可能會導致峰拖尾
不要讓檢測器在高鹽洗脫液中閑置。用水徹底沖洗（以0.2 ml/min的流速沖洗60分鐘），然后使用90/10水/甲醇或更高的有機洗脫液。
1.確保樣品可溶于流動相，樣品管理器清洗
2.遵循制造商關于清洗溶劑的建議。例如，acquity UPLC H-class生物系統推薦的洗滌劑含鹽量小于500 mm
3.如果出現可見的鹽沉積，請清潔表面。如果再次出現積鹽，請檢查連接和系統是否有問題。4
4.如果樣品管理器閑置超過2天，用高純水清潔針頭和/或管道（至少20個周期或200秒）。用90/10水/甲醇重復上述步驟燃氣輪機；樣品管理器在100 mm）管道中的閑置時間不得超過2天
紫外線檢測器：
在水性條件下執行sec或IEX時，waters建議使用鈦或不銹鋼光流池。標準acquity光流池的流道中含有聚四氟乙烯AF。在自然條件下，一些蛋白質可能與流動細胞表面發生相互作用，導致峰值拖尾和基線傾斜。對檢測器的建議包括：使用鈦或不銹鋼流動細胞來減少蛋白質與表面的相互作用。其他流動池材料（即特氟隆）可能會導致峰拖尾
不要讓檢測器在高鹽洗脫液中閑置。用水徹底沖洗（以0.2 ml/min的流速沖洗60分鐘），然后使用90/10水/甲醇或更高的有機洗脫液。
為保持較長的色譜柱壽命并將微生物污染的風險降至最低，應遵循以下建議：
- 色譜柱不得存放在高鹽、水性流動相或 100% 水中。
- 在切換到推薦的存儲條件之前，用 10-20 柱體積的水沖洗柱。
- 按照制造商的建議沖洗和儲存色譜柱。典型的建議是使用 10-20% 的甲醇或使用殺菌劑（即 0.1% 的疊氮化鈉）。
- 考慮使用保護柱來延長柱壽命。可能需要定期更換。保護柱更換頻率可能取決于樣品清潔度。
- 尺寸排阻柱通常可以儲存在 4-8 °C 以減少微生物生長。離子交換柱通常在室溫下儲存。有關詳細信息，請查看制造商的建議。
