我們在實驗檢測過程中色譜柱難免都會發現異常,有時無法找到異常情況出現的原因,這時候我們就該有所察覺分析出現的異常。當分析出現異常的情況就可以更換色譜柱了。
高背壓:
背壓的增加通常是HPLC色譜柱入口玻璃料堵塞的結果。要在大多數情況下消除堵塞,您可以降低流速使溶劑流過色譜柱,并使100%的強溶劑流過色譜柱以消除堵塞。如果您的壓力無法恢復正常,則玻璃料將被不可逆地阻塞,或者色譜柱中有空隙。兩種情況都需要更換色譜柱。
分裂峰:
色譜柱入口處的玻璃料堵塞也可導致許多分裂峰,從而導致進樣進樣。要解決此問題,請首先遵循上面概述的步驟。如果分離峰仍然存在,則可能是由于您的方法運行條件不正確(工作太接近化合物的pKa或使用強注入溶劑)或色譜柱被嚴重保留的污染物污染。如果進樣口不可逆轉地堵塞或固定相上沾滿了污染物,則需要更換色譜柱。
HPLC色譜柱是易耗品,因此隨著時間的流逝,您將開始失去關鍵色譜對的分離度。可能會進行某些色譜柱再生,并且每個色譜柱都有其自己的特定操作規程,但是,一旦達到關鍵化合物對的分離度損失并且無法再生,您的色譜柱就已經達到了特定色譜柱的自然壽命您正在做的分析。
寬峰形狀:
除了色譜柱壽命的自然終點外,還會出現一些峰展寬的原因,這些原因包括:進樣超載,緩沖不足,方法條件不當以及強進樣溶劑。但是,如果這些元素已被消除,則峰展寬是您色譜柱老化的一個標志。一旦您的峰形惡化到無法再通過系統適用性或解決關鍵對的時候,就該分開了。
色譜儀器顯示峰保留時間偏移經常是由于方法控制差而導致的,但是,在相污染的情況下,如果您的相出現結垢,您將看到峰的保留時間偏移。并非所有的峰都會受到同等的影響,如果您排除了故障排除中的所有方法問題,則可能的原因是固定相污染,因此您的色譜柱將需要更換。