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什么是高效液相色譜?

發布時間:2021-08-23

  需要簡單回答的基本問題是“什么是高效液相色譜?”簡而言之,當有機化合物是非揮發性的、熱不穩定的并且具有相對較高的分子量時,高效液相色譜是一種分離有機化合物混合物成分的分析技術。

  被稱為流動相的液體載體用于攜帶注入的樣品通過分離柱并到達檢測器。在分離柱中,基于物理-化學相互作用分離每個組分,洗脫順序基于這種相互作用。檢測器根據光吸收或折射率的變化、電化學/電導率的變化或簡單洗脫分子的尺寸分布來檢測分離的成分。


  探測器的響應呈峰形,其面積與存在量成正比。輸出由操作軟件監測評估,不僅計算響應,還支持操作參數,如進樣量、進樣順序、檢測波長、洗滌周期等。

  如今,可用軟件的高級功能使操作變得非常人性化。用戶將大部分時間花在流動相制備、緩沖液和標準品制備以及記錄條目上。

  分離科學為分析化學的發展和理解以及更好地控制消費品(如藥品、食品和飲料、聚合物、環境監測等)的質量做出了巨大貢獻。).主要得益于色譜技術,尤其是HPLC。


  高效液相色譜及其組分介紹

  高效液相色譜是一種流行且通用的技術,可為復雜有機樣品中成分的分離、鑒定和定量提供經濟的解決方案。乍一看,復雜模塊的組裝和一堆管道可能會嚇到你。然而,在深入了解每個組件的功能后,謎團將開始解開,高效液相色譜系統將成為一個用戶友好的設備。如果處理得當,它將確保結果和分析的最高準確性和可靠性。


  這些部分的不同組合是:

  泵
  探測器
  根據應用,燃料噴射器可以產生無限多種配置

  為了生成最可靠的數據,您需要充分了解高效液相色譜系統的組成和高效液相色譜的原理。對每個組件功能的概念性理解將提高您對高效液相色譜系統的舒適度,并確保長期使用和對輸出數據的高度依賴。


  液相

  液相以恒定速率泵入帶有固定相的色譜柱。在進入色譜柱之前,分析樣品被注入載液中。

  到達色譜柱后,根據分析物分子和固定相之間的物理化學相互作用,樣品組分被選擇性保留。


  流動相

  流動相用于將樣品輸送到系統中。流動相的基本標準是對樣品組分的惰性。通常使用純溶劑或緩沖液的組合。該流相應地沒有顆粒雜質,并且在使用前脫氣。


  流動相容器

  這些是用于流動相儲存和運輸的惰性容器。一般來說,透明玻璃瓶用于方便目視檢查容器中的流動相水平。內部安裝了不銹鋼顆粒過濾器,以去除流動相中的顆粒雜質(如果有)。泵

  流動相流速的變化會影響樣品組分的洗脫時間,導致誤差。該泵在恒定壓力下向色譜柱提供恒定的流動相流量。


  燃料噴射器

  注射器用于將樣品以恒定體積注入流動相中。注射的慣性和再現性是保持高精度所必需的。


  圓柱

  色譜柱為不銹鋼管,填充有固定相。它是一個重要的組成部分,應根據供應商的說明正確維護,以便在重復操作中獲得可重復性和分離效率。


  塔式爐

  分析操作過程中溫度的變化會導致分離的洗脫組分保留時間的變化。柱溫箱使用空氣循環來保持恒定的柱溫。這確保了流動相通過色譜柱的恒定流速。


  探測器

  檢測器對色譜柱分離的成分提供特定的響應,并提供所需的靈敏度。它必須獨立于流動相組成的任何變化。大多數應用需要紫外-可見檢測,但是基于其他檢測技術的檢測器現在也很流行。


  數據采集和控制

  現代高效液相色譜系統是基于計算機的,軟件控制操作參數,如流動相組成、溫度、流速、注射量和順序,以及輸出的收集和處理。

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