紫外分光光度計是一種常用的光度計產品。有了它,可以在紫外-可見區域隨機選擇不同波長的光。該儀器性能穩定,使用靈活,可靠性高,維護方便。紫外分光光度計在使用時需要校準。以下是紫外分光光度計的校準方法。
1.紫外分光光度計怎么校準?
分光光度法最重要的物理和化學量之一是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測量樣品溶液的吸光度非常重要。一般來說,分析結果的不可靠性與偶然和系統誤差有關。意外誤差會影響測量的準確性,但可以通過對足夠數量的測量進行統計處理來減少這些誤差。系統誤差會影響測量結果的準確性。在測量時,可以在大致相同的實驗條件下比較物質的精確測量結果,從而統一系統誤差。但系統(波長校正、分光光度計慢散光、放大器線性響應、比色皿暗電流和光路)和分光光度計的影響,會檢查和校正操作誤差(溫度變化、儀器讀數、操作者變化、純度、所用物質的稱量和濃度、pH值)和測量吸光度的操作誤差。在大多數情況下,通過嚴格遵循操作程序、將儀器調零和精確稱重,可以控制或減少操作誤差。通過定期校準儀器,可以克服儀器的系統誤差。分光光度計。如果需要高精度測量,必須每天校準儀器。
2.吸光度校準。
通常采用一定濃度的極純物質溶液作為吸光度校正的標準,溶液的吸光度系數由不同的實驗室進行檢查。為了防止標準溶液的吸光度因測量波長的微小偏差而發生變化,通常選擇吸收峰較平滑的物質。同時要求溶液穩定,在相當波長范圍內吸光度的變化符合比爾-朗伯定律。因此,通常使用硫酸銅、硫酸鈷銨和硝酸鈉或硝酸鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是最常用的標準溶液。這種解決方案適用于紫外線和可見光區域。
3.波長或波數校準。
具有窄吸收帶、過濾器或蒸汽的溶液可用于校正所需的光波范圍。如果要求高精度,放電燈泡發出的輻射可用于校正。一些光譜儀配有用于校準的燈。苯蒸汽也可用于校準特定范圍的波長。因此,在測量時,可以將一小滴苯放入一厘米厚的吸收杯中,測量其吸收波長。在遠紫外區,氧吸收帶可用于校正。也可以使用各種稀土金屬濾光片,可以快速校正波長,但精度沒有上述方法高。常用的過濾器是含有鈥、釹和鐠離子的過濾器。
4.雜散光校準。
少量的雜散光往往會導致較大的測量誤差。可以用能完全吸收某一波長單色光的溶液來校正,而對其他波長的吸收很弱。雜散光的近似值可以從溶液的透光率中推斷出來。雜散光引起的假吸收帶也可以用比爾-朗伯定律來檢驗。然而,用這一定律來檢驗假吸收是有很大誤差的。大約雜散光的百分比可以從截止范圍之外的透射率獲得。如果雜散光超過0.1%,盡量減少或校正測量的吸光度。由雜散光引起的誤差與雜散光輻射成正比,因此校正值可以很容易地從化合物的接近正確的曲線中計算出來。此外,可以使用適當的過濾器。濾光器在測量波長范圍內是完全透明的,但它可以吸收該范圍以外的光波,從而消除雜散光。