高效液相色譜 (HPLC) 是一種用于分離和鑒定化合物的實驗室技術。它是一種柱色譜法，依靠溶液中不同極性的化合物來分離它們。HPLC 與標準柱色譜不同，因為它使用壓力迫使溶液更快地通過色譜柱，因此產生更快、有時更準確的結果。目標是分離色譜柱中的化合物并讓它們分別離開。


      由于高效液相色譜的速度快且依賴于化合物的不同極性，因此結構和極性相似的兩種化合物可以同時或幾乎同時離開色譜儀。這稱為共流出。共流出使得準確確定混合物的哪一部分在什么點流出變得困難。


      高效液相色譜通常使用裝有由不同材料制成的珠子的玻璃柱。被迫通過柱子的混合物含有以不同強度與珠子結合的化學物質。結合強度取決于極性的相似性，決定了化學物質在釋放前與珠子結合的時間。一些化合物結合如此強烈，以至于它們基本上永遠不會從柱中的珠子中釋放出來，也永遠不會在離開柱的溶液中被測量。


     典型的實驗室分離技術包括開發一種分析或分離方法，然后實施該分析以從溶液中分離單個化合物。然而，這通常會導致多個解決方案也需要經過程序，從而導致復雜性呈指數級增長。雖然 HPLC 通常可以簡化和加速這一過程，但開發 HPLC 設備的成本可能會變得巨大。開發 HPLC 設備雖然效率更高，但比開發用于分離化合物的其他分析方法要昂貴得多。這使得許多小型私營實驗室在財務上不可行。


     高效液相色譜不僅用于分離簡單化合物，還用于從細胞混合物中分離特定蛋白質。在這種情況下，柱中的珠子通常涂有針對您需要收集的蛋白質的特異性抗體。蛋白質與抗體結合，剩余的溶液通過柱子，然后使用另一種溶液釋放蛋白質并收集。這需要高度熟練的技術人員隨時監控色譜柱并確保該過程完全按計劃運行。