高效液相色譜中如何降低柱壓?
發布時間:2021-09-26
根據定義,壓力在高效液相色譜系統中是固有的,因為溶劑被泵送通過小顆粒的填充床。色譜人員必須知道高效液相色譜柱和系統的“正常”壓力(以及未安裝高效液相色譜柱時的系統壓力),以便在壓力過高時開始排除故障。高壓液相色譜系統中的超壓通常來自液相色譜流道和液相色譜柱入口積聚的顆粒。高效液相色譜系統中顆粒的來源主要有三種:樣品、流動相和流路中隨時間磨損的組分。
在本官網中,我們假設您已經準確隔離了進入高效液相色譜柱的高壓源。請注意,管道堵塞是高效液相色譜中壓力上升的另一個常見原因,通過一次系統地移除一種成分并解決問題,可以很容易地識別出來。
高效液相色譜中如何降低柱壓?
高效液相色譜柱具有入口和出口過濾元件,用于將填料固定在柱中。通常,塔壓是由入口篩板堵塞引起的。嘗試吹回到高效液相色譜柱,以恢復“正常”的工作壓力。
如何反吹高效液相色譜柱?
反相高效液相色譜的柱取向
首先,從高效液相色譜系統中取出色譜柱,并將色譜柱的“出口”側連接到通常連接到入口的管道上。通常,入口的塔側現在是出口,這種新的出口流應該直接連接到廢液容器。請小心,因為你不能吹回檢測器(否則篩板/柱中的污染物最終會進入檢測器,你會有更多的問題需要消除)。
溶劑清洗塔
清洗溶劑的選擇基于可疑的污染和柱介質。如果懷疑有顆粒,根據色譜柱制造商推薦的溶劑方案,用高流量溶劑清洗色譜柱。如果您懷疑某些物質吸附在色譜柱填料上,請根據色譜柱制造商推薦的溶劑方案,用不同的溶劑以低流速清洗色譜柱。
將柱重新連接到其原始方向
啟動所需的方法。如果色譜柱壓力和色譜恢復到“正常”方法,則可能已經成功清洗了色譜柱。如果情況沒有恢復正常,可以考慮更長/更主動的反洗,但此時更換HPLC柱是最經濟的(并盡量避免將來柱壓過大)。
如何防止塔壓過大?
在可能的情況下,建議考慮在分析前過濾樣品。注射器、過濾瓶、過濾板和離心過濾器是受歡迎的選擇。從長遠來看,有效的樣品制備可以為您省錢,因為它有助于延長色譜柱壽命和系統正常運行時間。
即使樣品經過過濾,流動相和儀器部件的磨損也會對高效液相色譜柱造成嚴重損壞。因此,使用在線過濾器(作為日常維護的一部分定期更換篩板)和/或保護柱(作為日常維護的一部分定期更換保護柱)可以最大限度地減少進入高效液相色譜柱的顆粒。遵守預防性維護計劃允許您更換最終磨損的零件,并有助于防止系統壓力過大。預防性維護通常包括更換活塞密封件、轉子、針座等。總之,最好盡量減少顆粒進入高效液相色譜系統并到達高效液相色譜柱的機會。建議過濾樣品,使用優質溶劑(或過濾溶劑),日常維護系統,防止HPLC柱和系統壓力過大。如果您已經診斷出系統壓力來自高效液相色譜柱,建議嘗試吹回色譜柱。如果不成功,請更換該列。
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