對于高效液相色譜儀器的使用,如果不加以注意,錯誤使用使用的話,對其使用周期來說,是會縮減的,所以,為了延長高效液相色譜柱的使用期,就需要采取相應的保護措施。
工程師表示,由于色譜柱在儲存或運輸過程中,固定相可能會干掉,這會引起鍵合相的空間結構發生變化。因此,新的色譜柱在用來分析樣品之前,一定要充分平衡色譜柱。
反相色譜柱的平衡方法:
以純乙腈或甲醇作流動相,首先用低流速0.2ml/min將色譜柱平衡,然后,將流速增加到0.8mL/min沖洗30min以便將色譜柱的填料充分平衡至最佳狀態。平衡過程中,將流速緩慢地提高直到獲得穩定的基線,這樣可以保證色譜柱的使用壽命,并且保證在以后的使用中,獲得分析結果的重現性,同時,請一定確保所使用的流動相和乙腈-水互溶。
正相色譜柱,硅膠柱或極性色譜柱需要更長的時間來平衡。這些色譜柱在出廠測試后,都是保存在正庚烷中的,若極性色譜柱需要使用含水的流動相,要在使用流動相之前,用乙醇或異丙醇平衡。當使用乙醇、異丙醇、乙酸等粘度大的流動相時,色譜柱的平衡時間需延長。