氣相色譜-質譜(GC-MS)聯用技術測定動物組織中β2-興奮劑
動物組織加1%的高氯酸溶液勻漿,用乙酸乙酯:異丙醇(6∶4)萃取,經固相萃取柱凈化,BSTFA1%TMCS衍生后進行GC-MS測定。樣品中最低檢出濃度分別為特布他林0.5μg/kg、克倫特羅110μg/kg、沙丁胺醇0.2μg/kg。
詳細介紹:
1.色譜條件色譜柱:HP-5MS5%苯基甲基聚硅氧烷彈性石英毛細管柱(30m×0.25mm×0.25μm);進樣口溫度:300℃;柱溫程序:初溫150℃,保持3min,然后以10℃/min升至240℃,保持1min,再以20℃/min升至280℃,保持3min;載氣:高純氦氣(99.999%),流速110ml/min,不分流進樣。
2.質譜條件EI源,源溫230℃;電子能量70eV;接口溫度280℃,電子倍增器電壓1388V,質譜掃描范圍50~550amu;溶劑延遲:8min。
3.樣品處理稱取5.0g經過絞碎樣品,加1%高氯酸溶液30ml,在高速組織勻漿機中勻漿1min,然后在80℃下超聲15min,在5000r/min下離心10min,上清液移至分液漏斗中,用50%氫氧化鈉調節至堿性,加30ml有機溶劑振蕩提取,離心,有機相移入磨口具塞三角瓶中,重復提取一次,合并有機相,通過無水硫酸鈉,在50℃下旋轉蒸發至干。先用3ml乙腈與3ml正己烷溶解移入試管,混勻后分出正己烷相,乙腈相蒸干后用3%乙醇/乙酸乙酯溶解定容至2ml。取Cle-SLX柱先用5ml3%乙醇/乙酸乙酯淋洗,然后加1ml樣品提取液,加5ml5%甲醇/乙酸乙酯淋洗收集得組分1,然后用10ml50%甲醇/乙酸乙酯淋洗液收集得組分2,洗脫液分別用氮氣吹干。加100μlBSTFA1%TMCS,在60℃下衍生30min,氮氣吹干,加200μl甲苯溶解離心,取110μl進行GC/MS分析。
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