通過研究色譜圖所描繪的內容,我們可以簡單地理解色譜圖的定義。色譜圖是一個二維圖形,縱軸給出了檢測器在以下幾個方面的濃度響應,橫坐標代表時間。檢測器給出峰值響應,其高度應理想地取決于特定成分的濃度。
保留時間
保留時間(tr)
但由于分析條件的限制,峰可能偏離理想形狀,峰高不再是真實的濃度度量,而是將峰下面積視為組分濃度的度量。
每個峰代表樣品中存在的一種成分。保留時間是注射和最大峰值之間的時間間隔。它是運行條件下部件特性的特征。在相同的操作條件下,可以通過注入參考材料來確認成分的身份。對照品保留時間與組分峰的匹配證實了未知樣品組分的同一性。
現在讓我們考慮一個包含多個樣本組件的樣本。同樣,根據溶質-固定相的相互作用和流動相的流動特性,每種組分的洗脫保留時間也不同。
結果計算
成績統計
根據使用簡單算法的面積測量,可以容易地計算每種成分在總量中的濃度百分比。
% A=[乳膠]\frac{A峰面積X 100}{總峰面積(A B C D)}[/乳膠]
真實色譜圖
現在讓我們看看食品基質中維生素A和維生素E混合物的高效液相色譜分離的實際色譜打印輸出,看看色譜圖代表什么
色析法的
實際色譜圖
縱坐標以伏特為單位,橫坐標以分鐘為單位。紫外檢測器用于記錄波長為284納米的信號。
在色譜圖上方和下方的表格數據中,每個峰的保留時間用保留時間、面積(以數字單位表示)、峰面積%、高度和高度%標記。你可以觀察到,由于峰形的形狀不理想,每個成分的百分比面積和百分比高度是不同的,所以面積測量是一種更可靠的濃度測量。