熒光分析可以根據物質光致發光產生的熒光特性和強度,對物質進行定性和定量分析。目前,它還被廣泛用于表征體系的物理化學性質和變化,如生物大分子的構象和性質。熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。可根據樣品選擇石英反應杯(液體樣品)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)。熒光分析的優點:(1)高靈敏度(2)強選擇性(3)小樣本量(4)提供更多的物理參數(5)易于使用。但是,它也有一些缺點,如應用范圍不夠,對環境敏感(干擾因素較多)。
不同結構的熒光化合物具有特征的激發和發射光譜。因此,可以將熒光物質的激發和發射光譜的形狀和峰位與標準溶液的光譜進行比較,從而達到定性分析的目的。
2.定量分析在低濃度下,溶液的熒光強度與熒光物質的濃度成正比:F=KC。式中,f為熒光強度,C為熒光物質濃度,K為比例系數。這是熒光光譜定量分析的基礎。
熒光光譜的應用
熒光光譜在生物領域的應用熒光光譜法主要用于生物樣品中某些組分含量的測定,生物技術和免疫技術的分析,如脫氧核糖和脫氧核糖核酸的測定,以及DNA、抗體、抗原等的研究。各種熒光探針用于分析和檢測。主要分為生物納米熒光探針和生物非納米熒光探針。納米技術的興起開辟了熒光分析的新領域。納米材料具有良好的熒光、寬激發、窄發射等優良的光譜特性,是熒光分析領域研究人員十分感興趣的重要研究對象。
熒光光譜在藥物分析中的應用在藥物分析領域,熒光光譜可用于藥物活性成分的鑒定、藥代動力學研究、臨床藥理療效分析等。藥物熒光分析可分為直接熒光分析、間接熒光分析和納米熒光分析。常規熒光分析首次用于分析抗瘧藥物奎寧。隨著熒光分析技術的發展,它被廣泛應用于抗生素、鎮痛藥、鎮靜劑和止血劑的分析。
熒光光譜在食品中的應用熒光分析主要應用于該領域,分析檢測礦物質和金屬元素、氨基酸、維生素、真菌污染、添加劑、防腐劑、食品包裝中的有害物質、農藥殘留等,結合HPLC、TLC、FIA等技術,可以提高食品中各種物質的檢測方向。
熒光光譜在環境分析中的應用隨著有機化工、石油化工、醫藥工業的發展,以及農藥(農藥、除草劑等)的廣泛使用,有機化合物的危害越來越大,對環境的污染越來越嚴重。熒光分析可用于檢測環境中各種物質的含量,主要用于水、礦石和土壤。