1. 打開泵和檢測器的開關。


2. 先打開電腦，再打開打印機。


3. 顯示器上會出現“Hewlett Packard System Hardware Test”字樣，表示電腦正在檢查系統；硬盤。如果計算機沒有發現任何問題，顯示器將顯示“通過”字樣。


4. 接下來，輸入“C:\> win”進入HPLC系統。


5. 顯示器上將出現“HP Chemistation”字樣，然后雙擊“Instrument online HPLC system”。


6. 顯示器將顯示“HPLC system”字樣，它為您提供“峰”（進樣時）、流動相或溶劑的流速、波長和壓力。


7. 對于泵，點擊“pump on”按鈕，然后點擊“enter”。


8. 對于檢測器，單擊“燈亮”按鈕，然后單擊“進入”。之后，根據需要調整波長的大小。


9. 通過在計算機“儀器”和“設置泵”圖標處鍵入數值來調整泵的狀態。


9.1 流動相流速從 0.1 ml/min 開始調整


9.2 選擇合適的溶劑作為流動相；舉些例子


A. 乙腈


B. 水


C：醋酸


D. 甲醇


流動相可以混合在一起，例如B 10%，D 90%


10. 以 0.1 ml/min 的步長逐漸增加流動相的流速。隨著時間的推移，壓力越來越大。當顯示器上出現“Ready”字樣時，壓力就恒定了。然后將流動相的流速再增加一級。重復相同的方式，直到達到首選流量。等到基線穩定，然后準備注入樣品。


11. 在將樣品注入 HPLC 之前，用樣品清潔注射器。然后將樣品注入并加載到 HPLC 中，檢測器將檢測樣品的成分并計算時間。


12. 每個組分的峰將在不同的保留時間顯示在監視器上。當沒有檢測到更多峰時，按 F8 按鈕停止檢測樣品。


13. 計算機將計算并積分每個峰的面積。然后將結果以面積和保留時間之間的關系表示。單擊以下圖標可以查看峰和其他結果；“查看”、“數據分析”、“負載信號”和“積分結果”。